چکیده
آنتی بادی های مونوکلونال برعلیه ایمونوگلوبولین ها مولکول های ارزشمندی هستند که در مقایسه با آنتی بادی های پلی کلونال دارای مزایای متعددی از جمله یکنواختی و ویژگی بالاتر می باشند. این آنتی بادی ها به طور گسترده ای در تحقیقات زیستی، تشخیص و درمان مورد استفاده قرار می گیرند. تولید این نوع از آنتی بادی های مونوکلونال اغلب شامل خالص سازی ایمونوگلوبولین مورد نظر و استفاده از آن به عنوان آنتی ژن برای ایمن سازی موش است. با توجه به چالش های خالص سازی IgM از سرم ماهی، این مطالعه با استفاده از ماهی قزل آلا بعنوان مدل ، روشی ساده برای تولید آنتی بادی های مونوکلونال علیه IgM سرم ماهی، بدون نیاز به تخلیص IgM را مورد بررسی قرار می دهد.
در این روش، موش های Balb/c با سرم کامل ماهی قزل آلا به عنوان آنتی ژن ایمن شدند. سپس، سلول های هیبریدوما با استفاده از یک روش الایزا غیرمستقیم که برای شناسایی آنتی بادی علیه پروتئین متصل شونده به مالتوز (MBP) در سرم ماهی قزل آلا طراحی شده بود غربالگری شدند. این الایزا در میکروپلیت های پوشش داده شده با MBP انجام شد و در طی آن بترتیب سرم ماهی ایمن شده با MBP، مایع رویی هیبریدوما ها و کونژوگه پراکسیداز ضد IgG موش به پلیت افزوده شدند.
پس از شناسایی هیبریدوماهای مثبت ، ویژگی آنتی بادی های تولید شده برای IgM با استفاده از ایمونوبلات تأیید شد. در نهایت، کاربرد آنتی بادی های تولید شده به عنوان آنتی بادی ضد IgM در الایزا ، با نشان دادن وجود آنتی بادی علیه سایر آنتی ژن ها در سرم ماهی قزل آلا تأیید گردید. بنابراین، به نظر می رسد روش مورد استفاده در این مطالعه به طور کلی برای تولید آنتی بادی های مونوکلونال ضد IgM ماهی و بالقوه برای تولید آنتی بادی های مونوکلونال ضد ایمونوگلوبولین های سایر گونه های جانوری قابل استفاده می باشد.