نشریه دامپزشکی ایران

نشریه دامپزشکی ایران

ارزیابی آنتی‌بادی‌های متقاطع در میان سویه‌های بروسلا: اعتبارسنجی آزمون‌های تشخیص سرمی بروسلوز

نوع مقاله : مقاله پژوهشی

نویسندگان
1 دانشجوی دکترای تخصصی باکتری‌شناسی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه شهید چمران اهواز، اهواز، ایران
2 دانشیار گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه شهید چمران اهواز، اهواز، ایران
3 استاد گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه شهید چمران اهواز، اهواز، ایران
4 استاد گروه بهداشت مواد غذایی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه شهید چمران اهواز، اهواز، ایران
5 استاد گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه شهرکرد، شهرکرد، ایران
10.22055/ivj.2025.531580.2809
چکیده
    هدف مطالعه حاضر بررسی واکنش‌های متقاطع آنتی‌بادی در سرم گوسفند نسبت به سویه‌های واکسن و پاتوژن بروسلا و همچنین اعتبارسنجی نتایج آگلوتیناسیون با بکارگیری آزمون الیزا و استفاده از هر دو سویه واکسن و وحشی بروسلا است.  سویه‌های واکسن و وحشی استفاده شده شامل RB51، Rev1، B. melitensis و B. abortus بودند که همگی با آزمایش PCR تأیید شدند.  در مجموع 81 نمونه سرم گوسفند در این مطالعه گنجانده شدند که شامل نمونه ­های با واکنش مثبت و منفی در آزمون‌های آگلوتیناسیون بود.  پس از ارزیابی سرم‌ها، آزمون‌های الیزا غیر مستقیم با استفاده از لیپو پلی‌ساکارید باکتری برای اعتبارسنجی نتایج آگلوتیناسیون و برای ارزیابی آماری واکنش‌های متقاطع سرم نسبت به سویه‌های واکسن و وحشی بروسلا به کار گرفته شد.  از 81 نمونه سرم مشکوک ارزیابی شده، آزمون رزبنگال 61 نتیجه مثبت و 20 نتیجه منفی را نشان داد.  آزمون‌های رایت و 2ME رایت به ترتیب 38 و 36 نتیجه مثبت و 43 و 45 نتیجه منفی را نشان دادند.  براساس تحلیل منحنی ROC، بالاترین مساحت زیر منحنی 84 درصد برای IRIBA، 75 درصد برای Rev1، 70 درصد برای B. melitensis و 68 درصد برای B. abortus بود.  تحلیل آماری نشان داد که نوع آنتی‌ژن در آزمون‌های الیزا تأثیر معنی­ داری بر مقادیر S/P دارد.  میانگین و خطای استاندارد مقادیر S/P برای  واکسن Rev1 3/0 54±/0 B. melitensis 2/0 82±/0 ، برای واکسن IRIBA  04/0 82±/0 و آنتی‌ژن B. abortus 04/0 98±/0 بود. بالاترین حساسیت و ویژگی با استفاده از آنتی‌ژن‌های B. melitensis و IRIBA به ترتیب به دست آمد. در الیزا غیرمستقیم که از هر دو نوع واکسن و سویه‌های وحشی بروسلا استفاده شد، حساسیت و ویژگی مناسبی نشان حاصل شد که  بیان­گر واکنش متقاطع سویه‌های مورد آزمون  و همچنین، کاربرد آن به عنوان یک روش تشخیصی قابل اعتماد برای گوسفندهای واکسینه شده و آلوده است.
کلیدواژه‌ها

موضوعات


Abdelgawad, H. A., Lian, Z., Yin, Y., Fang, T., Tian, M., & Yu, S. (2023). Characterization of Brucella abortus Mutant A19mut2, a Potential DIVA Vaccine Candidate with a Modification on Lipopolysaccharide. Vaccines, 11(7), 1273.
Banyasz, B., Antal, J., & Denes, B. (2025). Ghostbuster—A Western Blot-Based Panel Method to Resolve False-Positive Brucellosis Serology Test Results. Microorganisms13(3), 574.
Berhanu, G., & Pal, M. (2020). Brucellosis: A highly infectious zoonosis of public health and economic importance. Journal of Emerging Environmental Technologies and Health Protection, 3, 5-9.
Cai, G. H., Guo, C. Y., Guo, K. X., Zhang, J. D., Chen, H. C., & Liu, Z. F. (2025). Development of a competitive ELISA based on Brucella neotomae lipopolysaccharide for detecting brucellosis in livestock. Analytical Biochemistry, 115880.
 Copin, R., Vitry, M. A., Hanot Mambres, D., Machelart, A., De Trez, C., Vanderwinden, J. M., ... & Muraille, E. (2012). In situ microscopy analysis reveals local innate immune response developed around Brucella infected cells in resistant and susceptible mice. PLoS pathogens, 8(3), e1002575.‏
Daro, B. S., Deneke, Y. A., & Negasa, J. G. (2024). Bovine Brucellosis: A Zoonotic Disease of Public Health and Economic Concern in Ethiopia. Journal of Clinical Case Studies Reviews & Reports, 2 (2), 1-8.
Davis Jr, M. R., & Goldberg, J. B. (2012). Purification and visualization of lipopolysaccharide from Gram-negative bacteria by hot aqueous-phenol extraction. Journal of visualized experiments: JoVE, (63), 3916.
Dorneles, E. M., Lima, G. K., Teixeira-Carvalho, A., Araújo, M. S., Martins-Filho, O. A., Sriranganathan, N., ... & Lage, A. P. (2015). Immune response of calves vaccinated with Brucella abortus S19 or RB51 and revaccinated with RB51. PloS one10(9), e0136696.
Falenski, A., Mayer-Scholl, A., Filter, M., Göllner, C., Appel, B., & Nöckler, K. (2011). Survival of Brucella spp. in mineral water, milk and yogurt. International Journal of Food Microbiology145(1), 326-330.
Galinska, E. M., & Zagórski, J. (2013). Brucellosis in humans-etiology, diagnostics, clinical forms. Annals of agricultural and environmental medicine20(2), 233-238.
Godfroid, J., Nielsen, K., & Saegerman, C. (2010). Diagnosis of brucellosis in livestock and wildlife. Croatian medical journal51(4), 296-305.
Golding, B., Scott, D. E., Scharf, O., Huang, L. Y., Zaitseva, M., Lapham, C., ... & Golding, H. (2001). Immunity and protection against Brucella abortus. Microbes and infection, 3(1), 43-48.
Golshani, M., & Buozari, S. (2017). A review of brucellosis in Iran: epidemiology, risk factors, diagnosis, control, and prevention. Iranian biomedical journal, 21(6), 349.‏
Haine, V., Sinon, A., Van Steen, F., Rousseau, S., Dozot, M., Lestrate, P., ... & De Bolle, X. (2005). Systematic Targeted Mutagenesis of Brucella melitensis 16M Reveals a Major Role for GntR Regulators in the Control of Virulence. Infection and immunity73(9), 5578-5586.
Heidary, M., Dashtbin, S., Ghanavati, R., Mahdizade Ari, M., Bostanghadiri, N., Darbandi, A., ... & Talebi, M. (2022). Evaluation of brucellosis vaccines: a comprehensive review. Frontiers in veterinary science, 9, 925773.
Haro, A. D. G., Samaniego, M. Y. B., Moreno-Caballeros, P., Burbano-Enríquez, A., Torres, V. A. S., Mulki, M. C. G., ... & Saegerman, C. (2025). Bayesian Estimation of the True Bovine Brucellosis Prevalence in Vaccinated and Non-Vaccinated Ecuadorian Cattle Populations, and the Sensitivity and Specificity of a Competitive and Indirect ELISA Using a New Synthetic Antigen. Microorganisms13(1), 69.
Ibarra, M., Campos, M., Hernan, B., Loor-Giler, A., Chamorro, A., & Nuñez, L. (2023). Comparison of diagnostic tests for detecting bovine brucellosis in animals vaccinated with S19 and RB51 strain vaccines. Veterinary World16(10), 2080.
Ibarra, M., Campos, M., Ibarra, C., Gladys, U., Huera, D., Gutierrez, M., Nunez, L. (2023). Financial losses associated with bovine brucellosis (Brucella abortus) in carchi-ecuador. Open Journal of Animal Sciences, 13(2), 205-216.
Idrees, H., Abbas, J., Raza, A., Qamar, M. H., Waheed, M. A., Arshad, M. B., ... & Raheem, A. (2024). A systematic overview of bovine brucellosis and its implications for public health: Bovine Brucellosis: A Zoonotic Threat. Letters In Animal Biology, 04(1), 01-09.
Islam, M. S., Habib, M. A., Tonu, N. S., Haque, M. S., & Rahman, M. M. (2025). Beyond Serology: A Meta‐Analysis of Advancements in Molecular Detection of Brucella spp. in Seronegative Animals and Biological Samples. Veterinary Medicine and Science11(1), e70200.
Jiao, H., Zhou, Z., Li, B., Xiao, Y., Li, M., Zeng, H., ... & Gu, G. (2021). The mechanism of facultative intracellular parasitism of Brucella. International journal of molecular sciences22(7), 3673.
Keyvanfar, A., Sali, S., & Zamani, A. (2021). Epidemiology, clinical and laboratory manifestations, and outcomes of brucellosis among 104 patients in referral hospitals of Tehran, Iran. Archives of Clinical Infectious Diseases16(2), e111546.
Khosravi, Mohammad. Ghorbanpour, Masoud. Fatemi Tabatabaei, Seyed Reza. Mohammad Alipour, Yasman. (2018). The effect of oral administration of betaine on the humoral immune response of mice to Brucella abortus. Iranian Veterinary Journal, 14(1), 2018.
Kiros, A., Asgedom, H., & Abdi, R. D. (2016). A review on bovine brucellosis: Epidemiology, diagnosis and control options. ARC Journal of Animal and Veterinary Sciences (AJAVS)2(3), 8-21.
Lalsiamthara, J., Gogia, N., Goswami, T. K., Singh, R. K., & Chaudhuri, P. (2015). Intermediate rough Brucella abortus S19Δper mutant is DIVA enable, safe to pregnant guinea pigs and confers protection to mice. Vaccine33(22), 2577-2583.
Legesse, A., Mekuriaw, A., Gelaye, E., Abayneh, T., Getachew, B., Weldemedhin, W., Tesgera, T., Deresse, G. and Birhanu, K. (2023). Comparative evaluation of RBPT, I-ELISA, and CFT for the diagnosis of brucellosis and PCR detection of Brucella species from Ethiopian sheep, goats, and cattle sera. BMC microbiology, 23(1), 216.
Li, Z. Q., Shi, J. X., Fu, W. D., Zhang, Y., Zhang, J., Wang, Z., ... & Zhang, H. (2015). A Brucella melitensis M5-90 wboA deletion strain is attenuated and enhances vaccine efficacy. Molecular Immunology66(2), 276-283.
Lopez-Goni, I., Garcia-Yoldi, D., Marin, C. M., De Miguel, M. J., Munoz, P. M., Blasco, J. M., & Garin-Bastuji, B. (2008). Evaluation of a multiplex PCR assay (Bruce-ladder) for molecular typing of all Brucella species, including the vaccine strains. Journal of clinical microbiology, 46(10), 3484-3487.
Markey, B., Leonard, F., Archambault, M., Culliname, A., and Maguire, D. (2013). Brucella species. Clinical Veterinary Microbiology. 2nd Ed. Elsevier, Toronto, Ontario, 325-334.
Martirosyan, A., & Gorvel, J. P. (2013). Brucella evasion of adaptive immunity. Future microbiology, 8(2), 147-154.
Pal, M., Gizaw, F., Fekadu, G., Alemayehu, G., & Kandi, V. (2017). Public health and economic importance of bovine Brucellosis: an overview. Am J Epidemiol5(2), 27-34.
Pandya, A. J., & Ghodke, K. M. (2007). Goat and sheep milk products other than cheeses and yoghurt. Small Ruminant Research68(1-2), 193-206.
Perez, R. O., Mata, R. A., & Dominguez, G. A. (2024). Retrospective Brucellosis Study in Mexico. International Journal of Veterinary Medicine3(1), 1-6.
Poester, F. P., Gonçalves, V. S., Paixao, T. A., Santos, R. L., Olsen, S. C., Schurig, G. G., & Lage, A. P. (2006). Efficacy of strain RB51 vaccine in heifers against experimental brucellosis. Vaccine24(25), 5327-5334.
Poester, F. P., Nielsen, K., Samartino, L. E., & Yu, W. L. (2010). Diagnosis of brucellosis. Open Veterinary Science Journal4(1), 46-60.
Priyantha, M. A. R. (2021). An overview of human brucellosis: a neglected zoonotic disease in livestock. Sri Lanka Veterinary Journal68(1-2), 27-37.
Rehman, S., Ullah, S., Kholik, K., Munawaroh, M., Sukri, A., Malik, M. I. U., ... & Sucipto, T. H. (2025). A detailed review of bovine brucellosis. Open Veterinary Journal15(4), 1520-1520.
Sadaqat, M. H. (2024). Pathogenesis, clinical manifestations, treatment and prevention of brucellosis in humans and animals. Afghanistan Journal of Basic Medical Science1(1), 85-90.
Sadeghifard, N., & Pakzad, R. (2023). Investigation of epidemiological features of brucellosis in Iran: A systematic review and meta-analysis study. Technology and Research Information System, 5(4), 0-0.
Smirnova, E. A., Vasin, A. V., Sandybaev, N. T., Klotchenko, S. A., Plotnikova, M. A., Chervyakova, O. V., ... & Kiselev, O. I. (2013). Current methods of human and animal brucellosis diagnostics. Advances in Infectious Diseases, 3(3), 177-184.
Sofian, M., Aghakhani, A., Velayati, A. A., Banifazl, M., Eslamifar, A., & Ramezani, A. (2008). Risk factors for human brucellosis in Iran: a case–control study. International journal of infectious diseases12(2), 157-161.
Stranahan, L. W., & Arenas-Gamboa, A. M. (2021). When the going gets rough: The significance of Brucella lipopolysaccharide phenotype in host–pathogen interactions. Frontiers in Microbiology, 12, 713157.
Whatmore, A. M. (2009). Current understanding of the genetic diversity of Brucella, an expanding genus of zoonotic pathogens. Infection, Genetics and Evolution9(6), 1168-1184.
World Organization for Animal Health (OIE), (2021) Chapter 2.4.3; Brucellosis (Brucella abortus, B. melitensis and B. suis) (infection with B. abortus, B. melitensis and B. suis) (version adopted in May 2016). In: manual of diagnostic tests and vaccines for terrestrial animals 2021, 355-398.
Yaeger, M. J., Holler, L. D. (2007). Bacterial causes of bovine infertility and abortion. In Current therapy in large animal theriogenology (2nd ed) Chapter 49, Elsevier, St. Louis, 389-399.
Yang, Z., Chai, Z., Wang, X., Zhang, Z., Zhang, F., Kang, F., ... & Yue, J. (2024). Comparative genomic analysis provides insights into the genetic diversity and pathogenicity of the genus Brucella. Frontiers in Microbiology, 15, 1389859.‏
Yousefinejad, S., Khosravi, M., Gharibi, D., Mayahi, M., & Seyfi Abad Shapouri, M. R. (2024). Tracking the antibody level against Ornithobacterium rhinotracheal in the serum of slaughtered turkeys in Khuzestan province using In-house ELISA. Iranian Veterinary Journal, 20(2), 128-138.
Zhang, H., et al. (2025). Establishment and application of a qPCR method for differential detection of Brucella S2 vaccine strain. BMC Veterinary Research, 21(1), 238.