دانشگاه شهید چمران اهواز نشریه دامپزشکی ایران 1735-6873 22 1 2026 04 21 Evaluation of the cross-reactive antibodies among Brucella strains: validation of serological detection tests of Brucellosis ارزیابی آنتی‌بادی‌های متقاطع در میان سویه‌های بروسلا: اعتبارسنجی آزمون‌های تشخیص سرمی بروسلوز 68 82 243199 10.22055/ivj.2025.531580.2809 FA فرنگیس نرگسی دانشجوی دکترای تخصصی باکتری‌شناسی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه شهید چمران اهواز، اهواز، ایران محمد خسروی دانشیار گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه شهید چمران اهواز، اهواز، ایران 0000-0002-2029-5067 داریوش غریبی استاد گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه شهید چمران اهواز، اهواز، ایران مهدی پورمهدی بروجنی استاد گروه بهداشت مواد غذایی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه شهید چمران اهواز، اهواز، ایران 0000-0002-9478-260X مسعود قربانپور استاد گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه شهرکرد، شهرکرد، ایران Journal Article 2025 06 28 The present study aimed to investigate the antibody cross-reactions in sheep serum against vaccine strains and pathogenic strains of Brucella, as well as validation of the agglutination results with ELISA using both vaccine and wild strains of Brucella. The used vaccine and wild strains were RB51, Rev1, B. melitensis, and B. abortus, all of which were confirmed by PCR test. A total of 81 sheep serum samples were included in the study, encompassing both positive and negative reactions in the agglutination tests. Following the characterization of the sera, indirect ELISA tests utilizing the lipopolysaccharide of the bacteria were employed to validate the agglutination results and to statistically assess the serum cross-reactions against the vaccine and wild strains of Brucella. Out of 81 evaluated suspected serum samples, the Rose-Bengal test yielded 61 positive and 20 negative results. The Wright and Wright-2ME tests revealed 38 and 36 positive, and 43 and 45 negative results, respectively. According to the ROC curve analysis, the highest area under the curve was 84% for IRIBA, 75% for Rev1, 70% for B. melitensis, and 68% for B. abortus. Statistical analysis indicated that the strain of antigen in ELISA tests had a significant effect on S/P values. The mean and standard error of the S/P values were as Rev1 vaccine 0.54 ± 0.03, B. melitensis 0.82 ± 0.02, IRIBA vaccine 0.82 ± 0.04, and B. abortus 0.98 ± 0.04. The highest sensitivity and specificity were achieved using B. melitensis and IRIBA antigens, respectively. The indirect ELISA utilizing both vaccine and wild strains of Brucella demonstrated appropriate sensitivity and specificity, suggesting its cross-reactions and potential as a reliable diagnostic method for vaccinated and infected sheep. هدف مطالعه حاضر بررسی واکنش‌های متقاطع آنتی‌بادی در سرم گوسفند نسبت به سویه‌های واکسن و پاتوژن بروسلا و همچنین اعتبارسنجی نتایج آگلوتیناسیون با بکارگیری آزمون الیزا و استفاده از هر دو سویه واکسن و وحشی بروسلا است. سویه‌های واکسن و وحشی استفاده شده شامل RB51، Rev1، B. melitensis و B. abortus بودند که همگی با آزمایش PCR تأیید شدند. در مجموع 81 نمونه سرم گوسفند در این مطالعه گنجانده شدند که شامل نمونه های با واکنش مثبت و منفی در آزمون‌های آگلوتیناسیون بود. پس از ارزیابی سرم‌ها، آزمون‌های الیزا غیر مستقیم با استفاده از لیپو پلی‌ساکارید باکتری برای اعتبارسنجی نتایج آگلوتیناسیون و برای ارزیابی آماری واکنش‌های متقاطع سرم نسبت به سویه‌های واکسن و وحشی بروسلا به کار گرفته شد. از 81 نمونه سرم مشکوک ارزیابی شده، آزمون رزبنگال 61 نتیجه مثبت و 20 نتیجه منفی را نشان داد. آزمون‌های رایت و 2ME رایت به ترتیب 38 و 36 نتیجه مثبت و 43 و 45 نتیجه منفی را نشان دادند. براساس تحلیل منحنی ROC، بالاترین مساحت زیر منحنی 84 درصد برای IRIBA، 75 درصد برای Rev1، 70 درصد برای B. melitensis و 68 درصد برای B. abortus بود. تحلیل آماری نشان داد که نوع آنتی‌ژن در آزمون‌های الیزا تأثیر معنی داری بر مقادیر S/P دارد. میانگین و خطای استاندارد مقادیر S/P برای واکسن Rev1 3/0 54±/0 B. melitensis 2/0 82±/0 ، برای واکسن IRIBA 04/0 82±/0 و آنتی‌ژن B. abortus 04/0 98±/0 بود. بالاترین حساسیت و ویژگی با استفاده از آنتی‌ژن‌های B. melitensis و IRIBA به ترتیب به دست آمد. در الیزا غیرمستقیم که از هر دو نوع واکسن و سویه‌های وحشی بروسلا استفاده شد، حساسیت و ویژگی مناسبی نشان حاصل شد که بیانگر واکنش متقاطع سویه‌های مورد آزمون و همچنین، کاربرد آن به عنوان یک روش تشخیصی قابل اعتماد برای گوسفندهای واکسینه شده و آلوده است.

https://www.ivj.ir/article_243199_e418f6b69d01cf76830f746668d45e28.pdf