دانشگاه شهید چمران اهواز نشریه دامپزشکی ایران 1735-6873 19 4 2024 02 20 Investigating the status of Brucella melitensis contamination and comparing different molecular and non-molecular diagnosis methods in one of Kennel dogs in suburb of Tehran- Iran بررسی وضعیت آلودگی به بروسلا ملی‌تنسیس و مقایسه روش‌های مولکولی و غیر مولکولی تشخیصی آن در یکی از مراکز پرورش سگ اطراف تهران 108 119 191765 10.22055/ivj.2023.387783.2563 FA حمید قاسم‌زاده‌نوا دانشیار گروه مامایی و بیماری‌های تولیدمثل دام، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران 0000-0002-6957-2782 سید علی آیتی نجف آبادی دانش‌آموخته دکتری عمومی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران 0000-0002-6038-7935 غلامرضا نیکبخت بروجنی استاد گروه میکروبیولوژی و ایمونولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران 0000-0002-2970-5827 ایرج اشرافی تمای کارشناس گروه میکروبیولوژی و ایمونولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران Journal Article 2023 02 28 Brucellosis caused by Brucella melitensis is one of the important health and economic diseases in Iran is very important to pay attention to it as a zoonotic disease. The aim of the study was to investigate B. melitensis infection in a kennel dog and also to compare different laboratory methods to diagnose Brucella melitensis infection in dogs. In this study, the whole blood samples (for PCR and culture), vaginal swabs samples (for PCR tests) and serum samples (for Rose Bengal, Wright and 2 mercaptoethanol tests) were obtained from 14 bitches at a kennel, in which a bitch had been aborted due to Brucella melitensis infection. Also, the whole blood sample and semen sample were obtained from the only male dog of this kennel for PCR test. Finally, the data obtained from these tests were analyzed by calculating the sensitivity and specificity as well as the Kappa coefficient. Bacteriological culture results of all blood samples were negative. The PCR results of seven blood samples (%50) and eight vaginal swab samples (%57.1) obtained from 14 bitches were positive. By using PCR primers, B. melitensis were identified in all positive samples. In the serological test, out of 14 sera obtained from bitches for the Rose Bengal screening test, eight positive samples were observed, but only one positive sample was observed in Wright and 2 mercaptoethanol tests. The results showed that the sensitivity and specificity of PCR test in vaginal swab samples was 100% and there is an excellent performance (kappa coefficient = 1) between the results of the Rose Bengal test and PCR of vaginal swab samples in the diagnosis of Brucella melitensis in dogs. In dogs suspected of brucellosis, at first it is recommended to take a sample of the animal's blood to perform the Rose Bengal test, and if the result is positive, to confirm the diagnosis and to determine the strain of Brucella, then a vaginal swab sample should be taken to perform the PCR test. بروسلوز ناشی از بروسلا ملیتنسیس یکی از بیماریهای مهم بهداشتی و اقتصادی در ایران است که توجه به آن به عنوان یک بیماری زئونوز بسیار حایز اهمیت میباشد. هدف از این مطالعه بررسی وضعیت آلودگی به بروسلا ملیتنسیس در یک مرکز پرورش سگ در اطراف تهران و مقایسه روشهای آزمایشگاهی مختلف برای تشخیص عفونت ناشی از بروسلا ملیتنسیس در سگها و انتخاب بهترین روش(ها) برای تشخیص سریع عارضه بوده است. نمونههای خون کامل (برای انجام آزمون PCR و کشت)، سوآب واژن (برای انجام آزمون PCR) و نمونه سرم (برای انجام آزمونهای سرولوژی رزبنگال، رایت و 2 مرکاپتواتانول (2ME) از 14 قلاده سگ ماده موجود در یک پرورشگاه سگ اطراف تهران که در آن یک قلاده سگ ماده به علت عفونت با بروسلا ملیتنسیس سقط کرده بود، جمعآوری شد. افزون بر آن نمونه منی و خون کامل از تنها قلاده سگ نر آن پرورشگاه برای انجام آزمون PCR گرفته شد. کشت تمام نمونههای خون منفی بود. در آزمون PCR انجام شده بر روی نمونههای خون و سوآب واژن اخذ شده از سگهای ماده (14 نمونه) به ترتیب 7 نمونه (50 درصد) و 8 نمونه (1/57 درصد) مثبت مشاهده شد که با استفاده از پرایمرهای طراحی شده گونه به روش مولتیپلکس، در تمام موارد بروسلا ملیتنسیس تشخیص داده شدند. بر اساس نتایج آزمون سرولوژی از 14 سرم جداسازی شده از سگهای ماده برای آزمون غربالگری رزبنگال، هشت نمونه مثبت و در آزمونهای رایت و 2 مرکاپتواتانول تنها یک نمونه مثبت مشاهده شد. نتایج حاصله نشان داد که حساسیت و ویژگی نتایج نمونههای PCR در نمونههای سوآب واژن 100 درصد بوده است و عملکرد عالی (ضریب کاپا=1) بین نتایج آزمون رزبنگال و PCR نمونههای سوآب واژن در تشخیص بروسلا ملیتنسیس در سگ‌هایی که در مراکز پرورش قرار داشته، وجود دارد. در سگهای مشکوک به بیماری بروسلوز توصیه میشود ابتدا نمونهگیری از خون حیوان جهت انجام تست رزبنگال انجام شود و در صورت مثبت بودن نتیجه، جهت تأیید تشخیص و نیز مشخص کردن سویه بروسلا، نمونه سوآب واژن جهت انجام تست PCR اخذ شود.

https://www.ivj.ir/article_191765_9438b3890aa6854585cbd0747efabbd8.pdf