@article { author = {Houshmand, Hossein and seyfi abad shapouri, Masoud reza and Peyghan, Rahim and G.Marammazi, Jasem and Afsharnasab, Mohammad}, title = {Cloning and expression of VP28 gene of white spot virus (Iran isolate) in E. coli, TG1}, journal = {Iranian Veterinary Journal}, volume = {11}, number = {1}, pages = {110-119}, year = {2015}, publisher = {Shahid Chamran University of Ahvaz}, issn = {1735-6873}, eissn = {2676-704X}, doi = {10.22055/ivj.2015.8717}, abstract = {    White spot virus is concerned as a major pathogen in shrimp Penaeids family. In recent years, heavy mortalities in cultured shrimps Iran and other countries necessitate doing studies to construct kits for rapid detection and eliciting resistance against the virus by using different membrane proteins. For this purpose, in this study, a piece of VP28 gene of white spot virus with 528 bp length was isolated and amplified by PCR from the infected shrimps in Choebdeh Abadan. After cloning of the gene in the plasmid pMal-c2X, the protein was expressed in E. coli strain TG1. Target protein with a molecular weight of 19.38 kDa was evaluated by SDS-PAGE. Expression of protein with the expected molecular weight in SDS-PAGE accompanied with evaluation of the cloned sequences revealed the successful expression of the protein in Escherichia coli TG1. This study for the first time succeeded in cloning and experssion of VP28 in a prokaryotic organism. }, keywords = {white spot virus,VP28,Cloning,Expression}, title_fa = {کلونینگ و بیان ژن VP28 از یک جدایه ویروس لکه سفید ایران در باکتری E.Coli سویه TG1}, abstract_fa = {    ویروس لکه‌ی سفید عامل بیماری‌زای مهمی در میگوهای خانواده‌ی پنائیده است که در چند سال گذشته تلفات قابل توجهی را در میگوهای پرورشی ایران ایجاد کرده است.  مطالعات لازم در خصوص ساخت کیت‌های تشخیص سریع و ایجاد مقاومت در برابر ویروس محلی با استفاده از پروتئین‌های مختلف غشاء و کپسید ویروس ضروری به نظر می‌رسد.  در راستای این هدف، در این مطالعه، قطعه‌ای از ژن VP28 ویروس لکه سفید (جدایه‌ی ایرانی) با طول bp 528 از میگوهای پرورشی آلوده به ویروس در چوئبده آبادان جداسازی و با روش PCR تکثیر داده شد، سپس ژن مذکور در پلاسمید pMal-c2X کلون گردید و پروتئین مورد نظر در باکتری اشریشیاکلی سویه TG1 بیان گردید.  بررسی نتایج SDS-PAGE وجود پروتئین بیان شده VP28 با وزن KDa 36/19 را تأیید نمود.  مشاهده‌ی پروتئین مذکور با وزن مولکولی قابل انتظار در SDS-PAGE و بررسی توالی ژن کلون شده نشان دهنده‌ی بیان موفق این پروتئین در باکتری اشریشیاکلی TG1 بود.  در این تحقیق، ژن VP28 برای اولین بار از یک جدایه ویروس ایرانی جداسازی و پروتئین آن در یک سیستم بیانی پروکاریوتی بیان شده است.}, keywords_fa = {ویروس لکه سفید,پروتئین VP28,کلونینگ و بیان}, url = {https://www.ivj.ir/article_8717.html}, eprint = {https://www.ivj.ir/article_8717_87eee0aecdab20ca1f123307a32d8dad.pdf} }