@article { author = {Najafi, Zohreh and Seyfi Abad Shapouri, Masoud Reza and Pasandideh, Reza}, title = {Design and construction of a recombinant gene construct expressing bovine leukemia virus p24 protein in Escherichia coli}, journal = {Iranian Veterinary Journal}, volume = {14}, number = {1}, pages = {89-96}, year = {2018}, publisher = {Shahid Chamran University of Ahvaz}, issn = {1735-6873}, eissn = {2676-704X}, doi = {10.22055/ivj.2017.55672.1750}, abstract = {Enzootic bovine leukemia (EBL) is a retroviral disease which is caused by bovine leukemia virus (BLV) and typically occurs in the industrial farms. The disease reduces the productivity of animals and therefore causes considerable economic losses in herd. BLV infections control program is consisted on serological assays, identification and isolation or culling the seropositive animals. In this study the gene encoding p24 protein of BLV was amplified by PCR, ligated into the prokaryotic expression vector, pMalc2x, and subsequently expressed in DH5α strain of Escherichia coli. Expressed recombinant protein was analyzed using SDS-PAGE and western blotting (immunoblot) assay. Molecular weight of the expressed protein (63 kDa) was consistent with the expected molecular weight of maltose binding protein-p24 fusion protein. Western blotting analysis showed that the expressed p24 protein specifically reacted with a positive anti-BLV commercial serum. Thus, in this study the p24 protein of BLV was successfully expressed by the pMalc2x-p24 recombinant construct in Escherichia coli.}, keywords = {Bovine leukemia virus (BLV),p24 recombinant protein,Escherichia coli}, title_fa = {طراحی و ساخت یک سازه ژنی نوترکیب بیان کننده پروتئین p24 ویروس لکوز گاوی در اشرشیاکلی}, abstract_fa = {لکوز انزئوتیک گاوی(EBL) یک بیماری رتروویروسی است که بوسیله ویروس لکوز گاوی (BLV) ایجاد و عموماً در دامداری‏های صنعتی مشاهده می‏شود. این بیماری موجب کاهش توان تولید و بروز خسارت‏‏های اقتصادی قابل توجه در گله می‏شود. کنترل عفونت‏های ناشی از BLV با انجام آزمایش‏های سرولوژی، شناسایی و جداسازی یا حذف حیوانات سرم مثبت انجام می‏گردد. در این مطالعه، ژن پروتئین p24 از BLV پس از تکثیر توسط PCR، به پلاسمید بیانی پروکاریوتی pMalc2x منتقل و در سویه DH5α از اشرشیاکلی بیان شد. بیان پروتئین نوترکیب با استفاده از روش SDS-PAGE و متعاقب آن وسترن بلات (ایمونوبلات) بررسی شد. وزن مولکولی پروتئین بیان شده (63 کیلودالتون) با وزن مولکولی مورد انتظار از پروتئین فیوژن، مطابقت داشت. آنالیز وسترن بلات نشان‏ داد که پروتئین p24 بیان شده به طور اختصاصی با یک سرم مثبت تجاری حاوی آنتی‏بادی ضد BLV واکنش داد. بنابراین در این مطالعه پروتئین p24 از ویروس لکوز گاوی با موفقیت توسط سازه نوترکیب p24-pMalc2x در اشرشیاکلی بیان شد.}, keywords_fa = {ویروس لکوز گاوی (BLV),پروتئین نوترکیب p24,اشرشیاکلی}, url = {https://www.ivj.ir/article_60942.html}, eprint = {https://www.ivj.ir/article_60942_7e6f54fe9aa75f866e8d5b53151814af.pdf} }